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植物甾醇对黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

2023-01-13 10:35:09

祝 惠,陈柏东,陈晓林,刘承鑫,刘 燊,张辉华,冯 鑫*

(1.佛山科学技术学院 生命科学与工程学院,广东 佛山 528225;2. 佛山市正典生物技术有限公司,广东 佛山 528138)

现代肉鸡养殖业发展迅速,高密度养殖导致畜禽疫病多发,抗生素滥用使得食品安全问题日益严峻,替抗饲料添加剂成为动物学家的研究热点。植物甾醇(Phytosterol,PS)是一类具有植物活性成分的甾体化合物,通常以游离甾醇、甾醇酯、甾基糖苷或酰基化甾基糖苷的形式广泛存在于植物油、坚果、植物种子及蔬菜、水果等植物性食物中,是植物细胞的重要组成成分。大量研究证明,PS不仅具有调节生长、抗氧化、抗癌、抗肿瘤和消炎退热等功效,且一定剂量下无明显毒性和副作用。PS作为一种新型促生长剂,在畜禽生产中的应用逐年增加,研究证明PS在猪、牛、鸡生产以及水产养殖业上,促生长效果明显。吴先华等研究表明日粮中添加200 mg/kg 的PS对育肥猪生长性能及血清生化指标改善效果最佳。谢颖等研究表明,在奶牛日粮中添加200 mg/d 的PS可有效提高产奶量。黄志毅等研究表明,在清远麻鸡日粮中添加200 g/t 的PS促生长效果佳。潘忠超等研究表明,罗氏沼虾基础饲料中添加40 mg/kg PS可获得最佳生长性能和肌肉品质。

PS结构功能与胆固醇相似,研究发现PS通过与胆固醇竞争靶位点,从而影响胆固醇的吸收代谢。动物生产中应激反应对动物生产性能和产品质量会造成严重影响。PS可以通过清除自由基、恢复氧化还原平衡、解除慢性氧化应激,从而保护机体免受氧化损伤。

本试验旨在研究日粮添加植物甾醇对黄羽肉鸡生长性能、血清生化指标和抗氧化能力及相关生长因子的影响,为其在黄羽肉鸡在生产中的应用提供参考数据。

1.1 试验材料

试验用鸡,岭南黄鸡Ⅱ号新土3型,由广州牧源禽业有限公司提供。

1.2 试验日粮

试验选用玉米-豆粕型颗粒状配合日粮(佛山市广牧兴饲料有限公司),各阶段日粮营养水平参考中国黄羽肉鸡营养需要标准(NY/T 33-2004),基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets

1.3 试验设计与方法

试验选用1日龄健康黄羽肉鸡360羽,随机分为3组,每组6个重复,每个重复20羽,试验期为63 d。饲喂日粮分组为:空白组为玉米-豆粕型基础日粮 (NC);
抗生素组为基础日粮+250 mg/kg 土霉素盐+200 mg/kg 那西肽(PC);
试验组为基础日粮+ 25 mg/kg 植物甾醇(PS)。

1.4 饲养管理

肉鸡釆用笼养方式,试验期间自由釆食和饮水。入雏前1周,鸡舍及水槽、料槽等全部洗净,并用甲醛和高锰酸钾熏蒸消毒。试验期间定期进行防疫消毒,饲养管理依据《现代肉鸡生产手册》进行,并按照常规免疫程序进行疫苗接种,每天保持24 h光照。试验期共63 d。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能 分别在试验期21、42及63日龄测定肉鸡空腹12小时体重,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G)。

1.5.2 血清生化指标、抗氧化指标及相关生长因子 于试验期第21、42及63天,从各重复中随机选择试验鸡1羽(每个处理组共6羽),进行翅静脉采血5 ml 。血液样品静置30 min ,然后以3 000 r/min 离心10 min ,取其上清液并于-20 ℃冷冻。后续测定血清样品中乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-CH)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-CH)、胆固醇(CHOL)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的含量。抗氧化指标包括总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)按照试剂盒测定方法进行分析(南京建成生物工程,南京),鸡胰岛素生长因子1(IGF-1)和白细胞介素6(IL-6)采用试剂盒进行测定(上海酶联生物科技有限公司,上海)。

1.5.3 内脏指数 对每只采血的鸡称量活体重后进行屠宰,摘取肝脏、脾脏、法氏囊、心脏,剔除脂肪,用滤纸吸干血水后称鲜重,计算内脏指数。

内脏指数(%)=相应内脏重量(g)/宰前空腹活重(g)×100

1.6 数据分析

试验数据用Excel 2010进行整理,用SPSS 20.0统计分析软件中重复度量分析模块进行分析,模型的固定效应包括处理、时间以及处理和时间的互作效应,采用Tukey法进行多重比较,<0.05为差异显著,<0.01为差异极显著。

2.1 植物甾醇对黄羽肉鸡生长性能的影响

PS对黄羽肉鸡生长性能的影响见表2。与NC、PC相比,日粮中添加PS对黄羽肉鸡的ADG、ADFI、F/G无影响(>0.05),三个试验组肉鸡的ADG、ADFI和F/G在不同生长阶段均差异极显著(<0.001)。

表2 植物甾醇对黄羽肉鸡生长性能的影响Table 2 Effects of phytosterols on growth performance of yellow-feathered broilers

2.2 植物甾醇对黄羽肉鸡血清生化指标的影响

PS对黄羽肉鸡血清生化指标的影响见表3。与NC、PC相比,日粮中添加PS对黄羽肉鸡血清TP、ALB、UA浓度无影响(>0.05)。不同生长阶段TP浓度差异极显著(<0.001)。PC组与PS组相比,CHOL含量差异显著(<0.01)。NC组和PS组血清HDL-CH含量差异不显著,但二者显著高于PC组(<0.01)。NC组与PC组之间ALT含量差异显著(<0.05),但PS组与二者均无显著差异(>0.05)。

表3 植物甾醇对黄羽肉鸡血清生化指标的影响Table 3 Effects of phytosterols on serum biochemical indexes of yellow-feather broilers

2.3 植物甾醇对抗氧化指标及相关生长因子的影响

由表4可知,日粮中添加PS对黄羽肉鸡的T-SOD、GSH-Px、T-AOC无显著性影响(>0.05),添加PS有降低MDA浓度的趋势(=0.06)。与NC组和PC组相比,日粮中添加PS显著提高了血清IGF-1含量(=0.004)。数值上PS组黄羽肉鸡IL-6含量最低,但统计上差异不显著(>0.05)。

表4 植物甾醇对黄羽肉鸡抗氧化指标及相关生长因子的影响Table 4 Effects of phytosterols on antioxidant indices and related growth factors in yellow-feather broilers

2.4 植物甾醇对黄羽肉鸡内脏指数的影响

植物甾醇对黄羽肉鸡内脏指数的影响见表5。添加PS不影响脾脏、心脏和法氏囊指数。与NC组相比,PC组和PS组均无显著差异(>0.05)。与PC组相比,添加PS显著提高了肝脏指数(<0.05)。

表5 植物甾醇对黄羽肉鸡脏器指数的影响Table 5 Effects of phytosterols on organ index of yellow-feather broilers %

3.1 对生长性能的影响

在饲养应用研究中有学者发现PS能刺激食欲,在水中能形成植物激素-植物甾醇-核糖核蛋白的复合体,这一复合体能增加原植物激素在动物体内分解的稳定性,促进动物蛋白质的合成,有利于动物的健康和生长。黄志毅等研究表明在817肉鸡基础饲粮中添加200 g/t PS,可以显著提高817肉鸡的平均末重和ADG,ADFI和F/G差异不显著。黄志毅等另一项研究表明在清远麻鸡基础饲料中添加200 g/t PS,麻鸡的平均末重和ADG显著高于对照组。贾代汉等试验结果显示,日粮中添加不同浓度的PS有提高肉仔鸡增重的趋势。姬红波等研究结果表明,不同剂量PS均能不同程度促进不同阶段肉鸡生长,提高饲料转化率,其中20 mg/kg 添加量达到最佳生产性能。邹胜龙等研究结果表明在快大黄鸡基础饲料中添加200 g/t PS,在1~16日龄、17~30日龄和31~45日龄黄鸡的ADG均高于对照组,ADFI也有所增加,F/G降低了1.28%。本试验结果显示日粮中添加PS对黄羽肉鸡的生长性能无显著性影响,与周春江等研究结果一致,可能由于添加量不同所致,另饲养期间为广东最炎热且天气变化较明显的时间段,可能对黄羽肉鸡产生一定影响。

3.2 对血清生化指标的影响

多项研究表明,PS具有降低血液中CHOL和低密度脂蛋白的作用。黄志毅等研究表明,添加200 g/t PS组的清远麻鸡血清中TG含量显著低于对照组,且HDL-CH含量显著高于对照组;
添加200和300 g/t PS组的清远麻鸡血清中LDL-CH含量均显著低于对照组。姬红波等研究表明,在AA肉鸡中添加PS可降低血清中总CHOL和LDL-CH的水平,但对HDL-CH和TG的含量没有影响。邹胜龙等试验结果显示,在快大黄鸡饲料中添加200 g/t PS,快大黄鸡血清中TG、CHOL和LDL-CH的含量有所降低,HDL-CH含量也高于对照组。可能原因为PS与CHOL结构相似,在动物肠腔内竞争性的与胆汁酸微粒结合,使CHOL不能被运送到小肠绒毛的吸收部位,从而抑制CHOL的吸收。试验发现血清中TP和ALB略有增加,葡萄糖含量显著低于对照组,这可能与PS促进机体代谢,利用机体葡萄糖氧化分解促进蛋白质合成有关。顾莞婷等发现PS对肉鸭血清中CHOL和LDL-CH含量具有降低作用,其中40 mg/kg 添加组显著降低。本试验结果表明,日粮中添加PS ,TG、ALB含量无显著性差异,CHOL和HDL-CH含量显著高于空白组和抗生素组,HDL-CH含量增加与黄志毅和邹胜龙的研究结果一致,但LDL-CH含量无显著影响。CHOL包括总胆固醇、HDL-CH和LDL-CH,日粮中添加PS显著提高HDL-CH含量,HDL-CH是高密度脂蛋白中的分子携带的胆固醇,它能反映出血浆中高密度脂蛋白的含量,主要功能是将肝外组织中过多的CHOL转运到肝脏代谢,以防CHOL在这些组织中堆积,有利于动物机体生长。试验结果显示HDL-CH含量增加,LDL-CH含量无影响,因而CHOL含量也有所增加。

3.3 对抗氧化能力及相关生长因子的影响

动物机体在正常代谢过程中会不断地产生自由基,导致组织细胞产生氧化损伤,同时自由基又能被体内的抗氧化系统清除。GSH-Px和T-SOD是机体内广泛存在的清除自由基的主要抗氧化酶,保护机体免受氧化损伤,减少脂质过氧化物的产生。MDA是自由基作用于脂质而发生过氧化反应的终产物,是反映膜脂过氧化程度的重要指标,其含量越高脂质受到氧自由基攻击的程度就越高。T-AOC是体内氧化与抗氧化物质共同作用的结果,是衡量机体抗氧化能力的综合指标。黄志毅等研究结果揭示试验组817肉鸡血清中T-SOD的活性显著高于对照组,血清中GSH-Px活性高于对照组,但差异不显著;
MDA含量低于对照组,差异不显著。邹胜龙等试验结果显示,添加200 g/t PS,快大黄鸡血清中GSH-Px活性显著提高,T-SOD活性也高于对照组,MDA含量也低于对照组,PS能提高快大黄鸡血清中抗氧化酶的活性,清除机体内的自由基,并减少氧化产物MDA的含量,减轻机体的氧化损伤。此外,PS的一个主要成分(β谷甾醇)被证明可以有效地改善1,2-二甲基肼诱导的大鼠结肠和肝脏组织中谷胱甘肽的耗竭和抗氧化酶包括T-SOD和GSH-Px的减少。本试验日粮中添加PS对抗氧化指标T-AOC、T-SOD和GSH-Px无显著性影响,与前人研究结果有出入,导致此结果的原因可能是PS添加剂量的不同、炎热天气产生的热应激及品种的差异。与PC组相比PS组MDA的浓度有明显降低趋势,但差异不显著。日粮中添加PS有降低MDA含量的趋势,表明PS一定程度上可以清除体内的自由基,改善脂质过氧化状态,减少脂质过氧化物的产生。

IGF-1参与动物体内蛋白质的同化作用,与饲料转化率呈正相关,血清中IGF-1的明显提升证明了PS有提高饲料转化率的潜力。目前无法阐明PS提升IGF-1的作用机制,但可以推测这可能与PS降低CHOL,缓解肝脏的负担,提高肝脏的功能有关。刘凡等的研究表明,饲料中添加PS能显著上调雄性日本鹌鹑IGF-1水平从而对其生产性能产生潜在影响,本试验结果与前人一致。与NC组和PC组相比,PS组IGF-1含量显著提高,但饲料转化率未明显提高,其原因可能是尚未达到最适添加量。IL-6是炎症起始阶段的一个重要致炎因子,主要介导急性期反应,于1980被发现,1986年被统一命名为IL-6,它是由184个氨基酸组成的多功能糖蛋白,在感染的早期应答中起重要作用。研究发现T淋巴细胞、B淋巴细胞、血管内皮细胞、单核巨噬细胞、滑膜细胞等多种细胞均可产生IL-6。日粮中添加PS,IL-6的含量低于NC组和PC组,PS可能是通过杀灭病原菌,来降低机体炎性反应程度,保证动物健康,提高生产性能。

3.4 对内脏指数的影响

免疫器官的重量增减一定程度上代表着机体的免疫强弱,本试验结果显示与PC组相比,PS组肝脏指数差异显著,PS组肝脏重量显著高于抗生素组,表明日粮中添加PS具有增强机体免疫机能的作用,这可能与IGF-1含量显著提高,缓解肝脏负担提高肝脏功能有关。但心脏、脾脏、法氏囊指数均无显著性差异,与邹胜龙等报道PS添加影响法氏囊指数结果不一致。

饲料中添加植物甾醇 25 mg/kg 不影响黄羽肉鸡生长性能,鸡胰岛素生长因子1含量和肝脏指数的提高表明其一定程度上可以促进黄羽肉鸡代谢及生长。

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